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| 品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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| 分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
| 分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC0240 |
| 規(guī)格 | 50T/24S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 土壤蔗糖酶檢測 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
土壤蔗糖酶( S-SC）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC0240
規(guī)格：50T/24S 土壤蔗糖酶檢測試劑盒 可見分光光度法 土壤蔗糖酶檢測試劑盒 可見分光光度法
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體5 mL×1瓶（自備） | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體35 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 試劑一：自備甲苯；
2、 試劑三：臨用前取1瓶加入15 mL蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑2-8℃保存2周；
3、 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入1 mL蒸餾水溶解備用，2-8℃可保存2周，或者用飽和苯甲酸溶液溶解，可保存更長時間。
產(chǎn)品簡介：
S-SC能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機體吸收，其酶促作用產(chǎn)物與土壤中有機質(zhì)、氮、磷含量，微生物數(shù)量及土壤呼吸強度密切關(guān)，是評價土壤肥力的重要指標(biāo)。
S-SC催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在540nm有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)540nm光吸收增加速率與S-SC活性成正比。
Sucrose Reducing Sugare 3-Amino-5-Nitrosalicylic Acid (540nm)
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、30-50目篩、冰、研缽、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，研磨，過30-50目篩。
二、測定步驟
1. 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至540nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至0.5、0.4、0.3、0.2、0.1 mg/mL，可參考下表。
序號 | 稀釋前濃度（mg/mL） | 標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL） | 蒸餾水體積（µL） | 稀釋后濃度（mg/mL） |
1 | 10 | 100 | 900 | 1 |
2 | 1 | 250 | 250 | 0.5 |
3 | 1 | 200 | 300 | 0.4 |
4 | 1 | 150 | 350 | 0.3 |
5 | 1 | 100 | 400 | 0.2 |
6 | 1 | 50 | 450 | 0.1 |
備注：實驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需200µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3. 加樣表：
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
風(fēng)干土樣（g） | 0.1 | 0.1 | - | - |
試劑一（μL） | 15 | 15 | - | - |
振蕩混勻，使土樣全部濕潤，37℃水浴或恒溫培養(yǎng)箱放置15min - | ||||
試劑二（μL） | 250 | 250 | - | - |
試劑三（μL） | 750 | - | - | - |
蒸餾水（μL） | - | 750 | - | - |
混勻，放入37℃水浴或恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時，10000g，4℃，離心5min，取上清液，將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋10倍（取0.1mL上清液，加入0.9mL蒸餾水）若后續(xù)測定吸光值仍大于1.5繼續(xù)稀釋。
| ||||
上清液（μL） | 200 | 200 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)液（μL） | - | - | 200 | - |
蒸餾水（μL） | - | - | - | 200 |
試劑四（μL） | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分混勻，放入沸水浴中煮沸5min（蓋緊，纏封口膜以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻。
540nm處蒸餾水調(diào)零，取全部反應(yīng)液于1mL玻璃比色皿中，讀取吸光值A，分別記為A測定管、A對照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管（每個測定管需設(shè)一個對照管），ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測1-2次。
三、S-SC活性計算
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（x，mg/mL）和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)（y，ΔA標(biāo)準(zhǔn)），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA測定（y，ΔA測定）帶入公式計算樣本濃度（x，mg/mL）。
2、S-SC活性計算：
單位的定義：37℃，每天每g土樣中產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個S-SC活力單位。
S-SC活力(U/g 土樣)= x ×10×V反總÷W÷T=101.5x
10：稀釋倍數(shù)；T：反應(yīng)時間，1d；V反總：反應(yīng)體系總體積，1.015mL；W：樣本質(zhì)量，0.1g。
相關(guān)發(fā)表文獻：
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參考文獻：
[1] Gao M, Song W, Zhou Q, et al. Interactive effect of oxytetracycline and lead on soil enzymatic activity and microbial biomass[J]. Environmental toxicology and pharmacology, 2013, 36(2): 667-674.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0280/BC0285 土壤堿性磷酸酶（S-AKP/ALP）活性檢測試劑盒
BC0110/BC0115 土壤多酚氧化酶（S-PPO）活性檢測試劑盒
BC4040/BC4045 土壤中性轉(zhuǎn)化酶（S-NI）活性檢測試劑盒
BC4030/BC4035 土壤β-1,4-葡聚糖酶（S-C1）活性檢測試劑盒
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