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諾爾絲菌素是一種抗菌劑,由土壤細(xì)菌的諾爾絲鏈霉菌產(chǎn)生,屬于抗生素中的一種其化學(xué)結(jié)構(gòu)為鏈絲菌素(STs)的亞類。鏈絲菌素由羧化的葡萄糖胺分子與非典型的氨基酸(streptolidine)和1-7個賴氨酸殘基聚合物(ST-F through ST-A and ST-X)組成(Khoklov & Shutova, 1972)。天然提取的諾爾絲菌素是ST-F 和ST-D的混合物。
與許多氨基葡萄糖苷類抗生素類似,如卡那霉素、慶大霉素、潮霉素B,抑制蛋白質(zhì)的合成。然而的結(jié)構(gòu)與這類抗生素的不相關(guān),并被認(rèn)為是有不同的機制(Cundliffe, 1989)。啟維益成提供的能廣泛地有效地抑制許多原核生物生長,并也被用于抑制真核生物的生長,如各種酵母菌、真菌、原生動物、昆蟲和植物(Hamano, Matsuura, Kitamura, Takagi, 2006)。 從S.noursei中分離出的nat1基因能抗。nat1基因編碼的酶能對STs的β-賴氨酸基團上的β-氨基(S)乙酰化(Kobayashi, Horinouchi, Uozumi, Beppu, 1987; Krügel , Fiedler, Haupt, Sarfert, Simon 1988)。nat1基因已被證明能在幾個外源體系中具有功能,使其成為分子遺傳學(xué)領(lǐng)域中一個有價值的篩選工具。用于靶向基因敲除的各種克隆載體的設(shè)計或作為穩(wěn)定可選擇的質(zhì)粒已被開發(fā)并廣泛使用(Goldstein & McCusker, 1999; Taxis & Knopp, 2006; Hamano, Matsuura, Kitamura, Takagi, 2006)。近的研究已經(jīng)鑒定了另外一種抗性基因,sttH,其活性通過一種*的抗性機制,能對酵母菌產(chǎn)生特異性抗性但細(xì)菌對其無抗性(Hamano, Matsurra, Kitamura, Takagi, 2006)。stth編碼的酶通過水解鏈絲菌素的內(nèi)酰胺環(huán)將STs轉(zhuǎn)化為酸性形式。
在相對較低的濃度下是有效的,對大多數(shù)生物體典型的選擇濃度下降為 50-200μg/mL之間。nat1基因還沒有顯示出與一系列其他的抗生素具有交叉抗藥性的作用,因此可與其他顯性抗性標(biāo)記基因結(jié)合使用(Haupt, Jona’k, Rychlik, Thrum, 1980)。還未作為治療的抗生素使用,所稱對臨床細(xì)菌分離物的抗性非常小。啟維益成提供的是酵母分子生物學(xué)的一個特別有用的篩選劑。不像一些營養(yǎng)缺陷型的標(biāo)記,的抑制效果對酵母菌生長率沒有影響,并可以用于篩選缺乏可用的營養(yǎng)標(biāo)記的工業(yè)或野生酵母菌(Goldstein & McCusker, 1999). Streptothricin antibiotic Nourseothricin (NTC) for a broad spectrum of bacteria and other unicellular or complex organisms. Preferred selection antibiotic for genetically modified Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeast, filamentous fungi, protozoa, microalgae, plants and many more. Selection of recombinant strains is based on inactivation of NTC by mono-acetylation of &sig;-amino group of the &sig;-lysine by Nouresothricin N-acetyltransferase the product of the sat1 or nat1 genes.
Selection:
For selection of recombinant Leishmania strains Nourseothricin (NTC) is added to growth medium to a final concentration of 100 g/ml.
用于細(xì)胞實驗,溶解后,用一次性針頭濾器過濾除菌。