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負(fù)染色又稱陰性染色,是由Hall發(fā)現(xiàn)的相對于普通染色(即正染色)而言的染色技術(shù)。其原理在于利用重金屬鹽包繞低電子密度的樣品,增強樣本四周的電子密度,造成細(xì)微結(jié)構(gòu)之間的“質(zhì)量-厚度”差異,增強散射吸收反差,使樣品在黑暗的背景上呈現(xiàn)明亮的結(jié)構(gòu)。負(fù)染色液有磷鎢酸、鉬酸銨、印度墨汁等,其中常用的是1~3%磷鎢酸。
磷鎢酸負(fù)染色液(5%)適用于顯示大分子、細(xì)菌、病毒、原生動物、噬菌體、細(xì)胞器、核酸大分子、蛋白質(zhì)晶體及其他大分子材料等,尤其適用于較難染色的樣本。染色后的樣品圖像呈現(xiàn)透明的亮光,而背景圖像呈黑色。