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酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布極廣泛,遍布各種組織,主要存在于細胞的溶酶體內,所以常作為溶酶體標志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內質網(wǎng)和胞質內。各種動物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的適宜pH為4.5~5.5。酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)以萘酚AS-BI為底物,在酸性pH下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚,萘酚與重氮鹽偶聯(lián)生成有色產物,定位于細胞質中。對某些酸性磷酸酶來講,Cu2+、酒石酸根離子和四氯化碳以及醛類也都是抑制劑,Mn2+為該酶的激活劑。多用于新鮮血涂片、細胞涂片、冰凍切片等,亦可用于石蠟切片。