品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | 貨號(hào) | G1282 |
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規(guī)格 | 5×50ml | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 糖原D-PAS染色液 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)
貨號(hào):G1282
規(guī)格:5×50ml/5×100ml
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。
過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。
PAS技術(shù)是*可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要準(zhǔn)確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白和糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情況下可用α-淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解。形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)準(zhǔn)唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液。
糖原D-PAS染色液的特點(diǎn)在于糖原PAS染色之前經(jīng)淀粉酶處理,糖原消化時(shí)需要兩張相同的切片,脫蠟后一張切片用含有淀粉酶的適當(dāng)緩沖液處理,另一張僅用緩沖液處理。然后兩張切片均用PAS法染色,消化后染色消失表明存在糖原。
產(chǎn)品說明:
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus 在 1946 年使用 PAS 技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。氧化劑能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的 1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎┡c Schiff 試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于氧化劑還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好氧化劑濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS 技術(shù)是可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但 PAS 技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要準(zhǔn)確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白和糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情況下可用α-淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解。形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用 PAS 技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)準(zhǔn)唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液。糖原 D-PAS 染色液的特點(diǎn)在于糖原 PAS 染色之前經(jīng)淀粉酶處理,糖原消化時(shí)需要兩張相同的切片,脫蠟后一張切片用含有淀粉酶的適當(dāng)緩沖液處理,另一張僅用緩沖液處理。然后兩張切片均用 PAS 法染色,消化后染色消失表明存在糖原。
操作步驟(僅供參考):
1、兩張相同切片,二甲苯脫蠟,梯度乙醇入水。
2、一張切片入淀粉酶溶液處理 20min。另一張不用淀粉酶溶液處理,入水 1h 作為對照。
3、流水沖洗兩張切片各 5~10min。
4、入氧化劑中,室溫(25-30℃)放置 5~8min,一般不宜超過 10min。
5、自來水沖洗 1 次,再用蒸餾水浸洗 2 次。
6、入 Schiff Reagent,置于室溫(25-30℃)陰暗處,浸染 10~20min。
7、自來水沖洗 10min。
8、入 Mayer 蘇木素染色液中,染細(xì)胞核 1~2min。
9、(可選)酸性分化液分化 2~5s。
10、自來水沖洗 10~15min 后,更換雙蒸水清洗,使其返藍(lán)。
11、 二甲苯透明,中性樹膠封固。
染色結(jié)果:
糖原、中性、唾液黏蛋白 紅紫色
各種糖蛋白 紅紫色
細(xì)胞核 藍(lán)色
未處理的切片,糖原呈亮紅色或紅紫色;淀粉酶處理的切片,糖原陰性。
注意事項(xiàng):
1、 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,否則影響染色效果。
2、 需使用一張陽性對照片驗(yàn)證酶的活性。
3、 氧化劑氧化時(shí)間不宜過久,氧化時(shí)的溫度以 18~22℃。
4、 試劑 A、試劑 B、試劑 C 應(yīng)置于 4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過多的陽光和空氣。使用前,提前取出恢復(fù)到室溫,避光暗處使用。
5、 酸性分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。
6、 在氧化劑和 Schiff Reagent 中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。
7、 冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。
8、 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Liraglutide reduces hepatic glucolipotoxicity?induced liver cell apoptosis through NRF2 signaling in Zucker diabetic fatty rats》 作者:Jun Guo,Cai Li,Chunxiao Yang,Bing Li,Jie Wei,Yajun Lin,Peng Ye,Gang Hu,Jian Li 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:29693190
糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
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