濾紙酶（FPA）活性檢測(cè)試
劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：BC2650
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 濾紙條：常溫防潮保存。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：10mg無(wú)水*萄糖。臨用前加入1 mL蒸餾水溶解，配成10 mg/mL葡萄糖溶液備用，2-8℃保存兩周。

產(chǎn)品說(shuō)明：
纖維素酶是降解纖維素生成葡萄糖一類酶的總稱，它不是單體酶，而是起協(xié)同作用的多組分酶系。以不溶性纖維素如濾紙為底物測(cè)定的纖維素酶稱為濾紙酶，研究濾紙酶活力對(duì)纖維素酶總體酶活力的研究的有著重要意義。

FPA水解濾紙產(chǎn)生還原糖，還原糖與3,5 -二硝基水楊酸反應(yīng)生成在540 nm有特征吸收峰的棕紅色物質(zhì)，通過(guò)測(cè)定540 nm處吸光值變化可計(jì)算得FPA活性。


注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式低溫離心機(jī)、水浴鍋、1 mL玻璃比色皿、超聲破碎儀、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水、EP管（2 mL）。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

1. 用干凈的鑷子取出濾紙條，帶手套將濾紙條卷成小卷放入EP管底部。

2. 當(dāng)A或ΔA超過(guò)1.2時(shí)，建議將樣本用蒸餾水稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

3. 顯色結(jié)束吸取檢測(cè)液時(shí)注意槍頭不要碰到濾紙條，以免帶入毛狀物，影響測(cè)定結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g平菇傘部加入1mL蒸餾水，冰浴勻漿后于4℃，12000 rpm離心10 min，取上清置于冰上待測(cè)。之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.668-0.425=0.243，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=1.6716x-0.2189，計(jì)算x=0.2763，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

FPA酶活（U/g 質(zhì)量）=x×V提取÷W÷T=0.0333x÷W=0.092 U/g 質(zhì)量。
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