葡萄糖脫氫酶（GCDH）
活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
紫外分光光度法
貨號(hào)：BC2690
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入15 mL試劑一溶解，用不完的試劑2-8℃保存8周；

2. 試劑三：臨用前每瓶加入5 mL試劑一溶解，用不完的試劑建議分裝后-20℃避光可保存4周；

3. 工作液的配制：按照試劑一︰試劑二︰試劑三為4︰3︰2的體積比例充分混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，用前37℃預(yù)熱10 min。

產(chǎn)品說(shuō)明：
GCDH（EC 1.1.1.47）催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H，主要存在于多種微生物和高等動(dòng)物的肝臟中。GCDH是一種制備高含量低聚果糖的理想用酶，同時(shí)也是臨床血糖測(cè)定的診斷用酶，可廣泛用于食品工業(yè)及醫(yī)藥工業(yè)領(lǐng)域中。
GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH，利用NADH在340nm處吸光值的變化即可反映葡萄糖脫氫酶的活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式低溫離心機(jī)、水浴鍋、1 mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

1. 樣本提取上清液置于冰上待測(cè)，且樣本提取完成后建議當(dāng)天提取當(dāng)天內(nèi)測(cè)完。

2. 當(dāng)A1或A2大于1時(shí)，建議將樣本用提取液稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。

3. 當(dāng)ΔA大于1時(shí)，建議將樣本用提取液稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g肝臟加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.726-0.682=0.044，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.031-0.031=0，ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.044-0=0.044，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：GCDH酶活（U/g質(zhì)量）=1607.7×ΔA÷W =1607.7×0.044÷0.1=707.388U/g 質(zhì)量。

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