品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | 貨號 | G8142 |
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規(guī)格 | 0.5mL | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 核酸染色 | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
注意:
本產(chǎn)品屬于微量核酸檢測試劑,使用時請嚴格按照說明書操作。第一次使用前請融化后離心再開封。
產(chǎn)品簡介:
GoldView II 是一種可代替溴化乙錠(EB)的新型花青類核酸染料,采用瓊脂糖電泳檢測 DNA 時,GoldViewII 與核酸結合后能產(chǎn)生很強的熒光信號,其靈敏度比 EB 強 5-10 倍,使用方法與之*相同。GoldView II 與核酸結合后,最大吸收峰為 497nm,另外,其在 254nm 處也有一強吸收峰,發(fā)射波長為 520nm,在紫外透射光下雙鏈DNA 呈現(xiàn)綠色熒光,而且也可用于染 RNA。通過 Ames 試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗、小鼠睪丸精母細胞染色體畸變試驗,致突變性結果均為陰性;而溴化乙錠(EB)是一種強致癌劑。因此用 Goldview II 代替 EB 不失為一種明智的選擇。本產(chǎn)品為 DMSO 溶解,低溫時為固體狀態(tài),溫度到達 20℃以上即可融化。
使用方法:
膠染:
由于 GoldView II 敏感度比 EB 高數(shù)倍,使用時,請將商品化的 Marker 用 1×DNA Loading Buffer 作 5-10 倍的稀釋,上樣 1-10µl, 以得到較好的結果(通常稀釋 10 倍后上樣 5ul)。對于待檢測樣品,通常僅需 1-2µl 即可。如果濃度較高,也須作一定倍數(shù)稀釋,否則會造成條帶不整,影響遷移速率。凝膠回收請選擇點染方法。
將 50ml 瓊脂糖凝膠溶液(濃度一般為 0.8%~2%)在微波爐中融化。
2. 冷卻至不燙手時加入 10-15µl GoldView II (不能少于 10ul),輕輕搖勻,避免產(chǎn)生氣泡。
3. 倒膠,待瓊脂糖凝膠*凝固后上樣電泳。
4. 電泳完畢在紫外燈下觀察。若使用數(shù)碼相機照像記錄,則關閉相機的閃光燈,放在自動檔即可;若使用凝膠成像系統(tǒng)照相,通過調(diào)節(jié)光圈、曝光時間,選擇合適的濾光片,可得到成像清晰的照片。
點染:
染色效果不如膠染方法,但成本更低,同時適用于凝膠回收。
1. 常規(guī)方法制備不含任何染料的瓊脂糖凝膠。
2. 用 3×Loading Buffer 將本產(chǎn)品稀釋 500-1000 倍,現(xiàn)用現(xiàn)配。
3. 取稀釋后的染料 2µl 與 5µl 樣本混勻后上樣即可 。
泡染:
1.常規(guī)方法制備不含任何染料的瓊脂糖凝膠。
2.上樣,電泳后將膠放入經(jīng) TAE 稀釋 2000 倍的染料中浸泡 30 分鐘即可
注意事項:
1. 膠厚度不宜超過 0.5cm,膠太厚會影響檢測的靈敏度。
2.雖然未發(fā)現(xiàn) GoldView II 有致癌作用,但其由 DMSO 溶解,對皮膚、眼睛會有一定的刺激,操作時應戴上手套。