品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號(hào) | BC5655 |
規(guī)格 | 100T/96S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 尿蛋白含量檢測(cè) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
尿蛋白含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)(麗春紅比色法)
微量法
貨號(hào):BC5655
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體24 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體1 mL×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制:
1、 試劑一工作液:臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑一:蒸餾水=0.1mL:0.9mL(1mL,1T)的比例配制試劑一工作液;
2、 標(biāo)準(zhǔn)品:5mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液。臨用前取80μL 5mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液,加入920μL蒸餾水,配制成0.4 mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液,現(xiàn)用現(xiàn)配。
產(chǎn)品說(shuō)明:
尿液中蛋白含量增加,表明腎臟系統(tǒng)的重吸收作用減弱,通??勺鳛槟I臟疾病臨床診斷的輔助依據(jù)。
在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅染料,離心得到的蛋白質(zhì)-染料復(fù)合物可溶解于堿性溶液,檢測(cè)其在560nm處的吸光值可計(jì)算得到樣本蛋白含量。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、2mL EP管、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理
1. 尿液等液體樣本:直接測(cè)定。若有渾濁請(qǐng)離心后取上清置于冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1.可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至560nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。
2.操作表:
試劑名稱(μL) | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
蒸餾水 | - | - | 400 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | - | 400 | - |
樣本 | 400 | - | - |
試劑一工作液 | 1000 | 1000 | 1000 |
充分混勻,3500rpm常溫離心10min,棄全部上清,留全部沉淀。 | |||
試劑二 | 200 | 200 | 200 |
充分溶解沉淀,于560nm處測(cè)定各管吸光值,分別記為A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)1-2次。 |
三、尿蛋白含量計(jì)算
尿蛋白含量(mg/mL)= ΔA測(cè)定×(C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V樣÷V樣= 0.4×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)
C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.4mg/mL;V樣:加入樣本體積,0.4mL。
注意事項(xiàng):
1、 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中離心步驟結(jié)束后,上清液需要全部除去,同時(shí)不可損失沉淀,否則會(huì)影響比色結(jié)果。
2、 如果?A測(cè)定小于0.006或測(cè)定管吸光值接近空白管,可以增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定;如果?A測(cè)定大于0.4,建議將樣本用蒸餾水適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。
參考文獻(xiàn):
[1] Michael A Pesce, Carl S Strande. A new micromethod for determination of protein in cerebrospinal fluid and urine[J]. Clinical Biochemistry, 1973, 19(11): 1265-1267.
[2] Jean Dube, Joel Girouard, Pierre Leclerc. et al. Problems with the estimation of urine protein by automated assays[J]. Clinical Biochemistry, 2005, 38(5): 479-485.
[3] Pan Ya. An analysis about the quantitative measurement of urinary protein[J]. China Health Standard Management, 2014, 5(18): 125-126.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
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