土壤中性*白酶活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC0275
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入6 mL試劑一，沸水浴攪拌溶解后待用，用不完的試劑可以2-8℃保存4周；

2. 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/mL 酪*酸溶液。

產(chǎn)品說(shuō)明：

土壤*白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。土壤中性*白酶在中性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。中性條件下，土壤中性*白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪*酸；在堿性條件下，酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)，在680nm有特征吸收峰。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器及用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、可調(diào)式移液槍、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水、研缽、30-50目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
當(dāng)吸光值大于1.5時(shí)，建議將上清液用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算時(shí)注意乘以稀釋倍數(shù)。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 分別稱取2份0.05g森林土樣于1.5mLEP管中，分別為對(duì)照管及測(cè)定管，按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)定吸光度，計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.582-0.355=0.227，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤質(zhì)量計(jì)算酶活得：

土壤中性*白酶活性(U/g 土樣)=0.05×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.05×0.227÷0.329÷0.05=0.69 U/g 土樣。

1. 分別稱取2份0.05g三葉草土于1.5mLEP管中，分別為對(duì)照管及測(cè)定管，按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)定吸光度，計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.23-0.177=0.053，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤質(zhì)量計(jì)算酶活得：

土壤中性*白酶活性(U/g 土樣)=0.05×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.05×0.053÷0.329÷0.05=0.1611 U/g 土樣。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
[1]Manyun Zhang, Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, et al. Evaluating the effects of phytoremediation with biochar
additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi. Environmental Science and Pollution Research. May 2018;(IF2.914)



[2]Zhang M, Wang W, Wang J, et al. Dynamics of biochemical properties associated with soil nitrogen mineralization following nitrification inhibitor and fungicide applications[J]. Environmental Science and Pollution Research, 2017, 24(12): 11340-11348..
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