品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC2100 |
規(guī)格 | 50T/48S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)活性檢測 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
6-磷酸葡萄糖酸
脫氫酶(6PGDH)活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號: BC2100
規(guī)格: 50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑二:臨用前配制,加入5 mL試劑一,混勻;
試劑三:臨用前配制,加入5 mL試劑一,混勻。
產(chǎn)品說明:
磷酸戊糖途徑途徑中6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)和6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)依次催化NADPH合成,與能量的平衡、生長速率和細(xì)胞活力等密切相關(guān)。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰,而NADP+沒有;通過測定340nm吸光度增加速率,計(jì)算6PGDH活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):
樣本處理等過程均需要在冰上進(jìn)行,且須在提取當(dāng)日完成酶活性測定,粗酶液避免反復(fù)凍融;
試劑二和試劑三須現(xiàn)配現(xiàn)用,當(dāng)天未用完試劑保存在4℃,可保存1周。
若樣本初始(0s)讀值大于0.5且ΔA測定小于0.1,可嘗試將樣本進(jìn)行稀釋后測定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
稱約0.1g腎臟組織,加入1mL試劑一,冰上充分研磨,10000rpm 4℃離心10min,取上清稀釋10倍,測得計(jì)算ΔA測定=A2測定-A1測定=0.256-0.154=0.102,ΔA空白=A2空白-A1空白=0,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:
6PGDH酶活性(U/g 質(zhì)量) =536×(ΔA測定-ΔA空白)÷W×10(稀釋倍數(shù))=5467.2 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):
Wu S, Wang H, Li Y, et al. Transcription factor YY1 promotes cell proliferation by directly activating the pentose phosphate pathway[J]. Cancer research, 2018, 78(16): 4549-4562.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1110/BC1115 NADP磷酸酶(NADPase)活性檢測試劑盒
BC0260/BC0265 6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)活性檢測試劑盒
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6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒 輔酶 6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒 輔酶