土壤速效鉀含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

微量法

貨號(hào)：BC3045

規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 提取液：若有晶體析出，37℃水浴溶解即可。

2、 試劑一：自備，甲醛。

3、 工作液：臨用前在1瓶試劑三B中加入2.805mL試劑三A，充分溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用，用不完的試劑2-8℃保存一周（每瓶配好的工作液可做37管樣本測(cè)定管試驗(yàn)）。

4、 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/mL鉀標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說(shuō)明：

速效鉀是土壤中易被植物吸收利用的鉀素，是表征土壤鉀素供應(yīng)狀況的重要指標(biāo)之一。及時(shí)測(cè)定和了解土壤速效鉀的含量及其變化，對(duì)耕地地力評(píng)價(jià)及對(duì)指導(dǎo)鉀肥的施用有著重要作用。

鉀離子與四苯硼鈉作用，形成不溶于水的白色四苯硼鉀沉淀，產(chǎn)生的濁度在一定范圍內(nèi)與鉀離子濃度成正比，通過(guò)檢測(cè)其在420nm處的濁度來(lái)測(cè)定土壤速效鉀的含量。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、振蕩器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、30-50目篩、甲醛（不允許快遞）、蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

新鮮土樣風(fēng)干，過(guò)30-50目篩。按照土壤質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約0.2g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000rpm，25℃離心10min（若離心后上清中仍有雜質(zhì)，建議將上清再次離心，至澄清），取上清液待測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至420nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

2、 臨用前將20 μmol/mL鉀標(biāo)準(zhǔn)液用提取液稀釋至1.2、1、0.8、0.6、0.4、0.3、0.2 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液待測(cè)。

3、 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表：

備注：實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需要50μL標(biāo)準(zhǔn)液。

4、 在EP管或96孔板中進(jìn)行以下操作（試劑一為有刺激性氣味的有毒物質(zhì)，建議以下試驗(yàn)在通風(fēng)櫥中操作）：

三、速效鉀含量計(jì)算

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)（y，ΔA標(biāo)準(zhǔn)），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA測(cè)定（y，ΔA測(cè)定）帶入公式計(jì)算樣本濃度（x，μmol/mL）。

2、速效鉀含量計(jì)算：

速效鉀含量（mg/kg）=x×10^-3 ×V樣總÷W×39=0.039x ÷W

10^-3：?jiǎn)挝粨Q算系數(shù)，1μmol=10^-3 mmol；V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，kg；39：鉀離子的相對(duì)分子質(zhì)量。

注意事項(xiàng)：

1、 提取液剛從低溫（4℃）條件取出會(huì)有晶體析出，震蕩使其溶解即可。

2、 甲醛為有刺激性氣味的有毒物質(zhì)，建議本試驗(yàn)在通風(fēng)櫥中操作。

3、 當(dāng)A測(cè)定大于1時(shí)，建議將樣本用提取液稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算時(shí)需在公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)；當(dāng)A測(cè)定小于0.15時(shí)，建議適當(dāng)增加土壤樣本質(zhì)量或減少提取液重新提取后再進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1、取0.2g土樣1加入1mL提取液，振蕩提取1h，取上清按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.218-0.062=0.156，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7128x-0.0301，計(jì)算x =0.261μmol/mL，按樣本質(zhì)量計(jì)算速效鉀含量得：速效鉀含量(mg/kg質(zhì)量)=0.039x ÷W=0.039×0.261÷0.0002=50.895 mg/kg質(zhì)量。

2、取0.2g土樣2加入1mL提取液，振蕩提取1h，取上清后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.801-0.055=0.746。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7128x-0.0301，計(jì)算x =1.089μmol/mL，按樣本質(zhì)量計(jì)算速效鉀含量得：速效鉀含量(mg/kg質(zhì)量)=0.039x ÷W=0.039×1.089÷0.0002=212.355 mg/kg質(zhì)量。

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