維生素B1（VB1）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào): BC4190
規(guī)格: 50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
1、提取液：內(nèi)含不溶物，使用前搖勻；
2、標(biāo)準(zhǔn)品：10mg維生素B1。臨用前加入1mL稀釋液，配成10mg/mL（即10000µg/mL）的標(biāo)準(zhǔn)液。
產(chǎn)品說(shuō)明：
維生素B1（Vitamin B1）又稱(chēng)硫胺素，以輔酶形式參與糖的分解代謝，在生物體能量代謝中有重要的作用。VB1在堿性條件下還原鐵*生成亞鐵*，亞鐵*與Fe³⁺在弱酸條件下生成普魯士藍(lán)，測(cè)定布魯士藍(lán)在704nm下的特征吸收峰，即可反映VB1的含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限： 7.366 µg/mL
線(xiàn)性范圍： 7.8125-250 µg/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、EP管、冰和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 稱(chēng)取0.1g腎臟，加入0.6mL提取液，60℃浸提30min，加蒸餾水0.4mL，混勻后于25℃，13000rpm離心10min，取上清，將上清稀釋20倍之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA= A測(cè)定管-A空白管=0.339-0.265=0.074，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)y=0.006x+0.001，計(jì)算x=12.17μg/mL，按樣本質(zhì)量計(jì)算VB1含量得： VB1（μg/g質(zhì)量）= x×V樣總÷W×20（稀釋倍數(shù)）=12.17×1÷0.1×20=2434 μg/g 質(zhì)量。

2. 稱(chēng)取0.1g三葉草，加入0.6mL提取液，60℃浸提30min，加蒸餾水0.4mL，混勻后于25℃，13000rpm離心10min，取上清，將上清稀釋40倍之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA= A測(cè)定管-A空白管=0.748- 0.265=0.483，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)y=0.006x+0.001，計(jì)算x =80.33μg/mL，按樣本質(zhì)量計(jì)算VB1含量得： VB1（μg/g質(zhì)量）= x×V樣總÷W×40（稀釋倍數(shù)）=80.33×1÷0.1×40=32132 μg/g 質(zhì)量。

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