品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC4110 |
規(guī)格 | 50T/24S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 脲酶(UE)活性檢測 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
脲酶(UE)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號:BC4110
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三A | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
試劑三B | 液體4 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑一:臨用前加6mL蒸餾水充分溶解;
試劑三:臨用前將A液倒入B液中混合,待用;
標(biāo)準(zhǔn)品:1mg/mL氮標(biāo)準(zhǔn)液。用蒸餾水稀釋至2μg/mL備用。
產(chǎn)品說明:
脲酶(UE)廣泛分布于植物的種子中,也存在于動物的血液和尿液中,某些微生物也能分泌脲酶。UE能夠水解尿素產(chǎn)生氨和碳酸,對尿素轉(zhuǎn)化起關(guān)鍵作用。利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N來反應(yīng)UE活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:
ΔA測定大于1時,建議將反應(yīng)混合液用蒸餾水稀釋或者樣本用蒸餾水稀釋后再進行測定。
實驗實例:
取0.1g綠豆加入1mL提取液進行樣本處理,取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.221-0.102=0.119,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.342-0.005=0.337,按樣本質(zhì)量計算酶活得:
UE活力(U/g質(zhì)量)=0.233×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.233×0.119÷0.337÷0.1=0.8228 U/g質(zhì)量。
取0.1g腎臟加入1mL提取液進行樣本處理,取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.315-0.226=0.089,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.342-0.005=0.337,按樣本質(zhì)量計算酶活得:
UE活力(U/g質(zhì)量)=0.233×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.233×0.089÷0.337÷0.1=0.6153 U/g質(zhì)量。
取火雞血清100μL直接按照測定步驟操作,測定計算測得計算ΔA測定=A測定-A對照=0.210-0.125=0.085,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.342-0.005=0.337,按液體體積計算得
UE活力(U/mL)=0.233×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=0.233×0.085÷0.337=0.0588 U/mL。
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