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  • 土壤芳基硫酸酯酶活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品名稱:

土壤芳基硫酸酯酶活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-12
儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
土壤芳基硫酸酯酶活性檢測(cè)試劑盒
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Soil Aryl Sulfatase(S-ASF)Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑,詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號(hào)BC3990
規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合

土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào):BC3990

規(guī)格:50T/24S

產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

液體3mL×1 瓶(自備)

2-8℃保存

試劑二

液體30mL×1

2-8℃保存

試劑三

粉劑×2

-20℃保存

試劑四

液體60mL×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

液體1mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一:甲苯自備;

2、 試劑三:臨用前取1瓶加入10mL蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑-20分裝保存一周,避免反復(fù)凍融;

3、 標(biāo)準(zhǔn)品:5mmol/L的對(duì)硝基苯*溶液。臨用前用試劑二將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋50倍得100μmol/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。(具體稀釋過(guò)程見(jiàn)操作步驟)

產(chǎn)品說(shuō)明:

土壤芳基硫酸酯酶來(lái)自于土壤微生物,能酶促土壤有機(jī)硫化物轉(zhuǎn)化為植物可吸收的無(wú)機(jī)態(tài)硫,在硫素的生物化學(xué)循環(huán)和植物的硫營(yíng)養(yǎng)代謝中具有重要的作用,是反映土壤質(zhì)量的一個(gè)重要生物學(xué)指標(biāo)。

S-ASF能夠催化對(duì)-硝基苯硫酸鉀生成對(duì)-硝基苯*,后者在410nm有特征光吸收。


注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、研缽、冰、30-50目篩、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過(guò)30-50目篩。

二、測(cè)定步驟

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min,波長(zhǎng)調(diào)至410nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:取20μL 5mmol/L的對(duì)硝基苯*溶液,加入980μL試劑二,充分混勻,配制成100μmol/L標(biāo)準(zhǔn)液待測(cè),現(xiàn)用現(xiàn)配。(實(shí)驗(yàn)中每管需要500μL,為減小實(shí)驗(yàn)誤差,故配制大體積。)

 

3、 加樣表:

試劑名稱(μL

測(cè)定管

對(duì)照管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

風(fēng)干土樣(g

0.1

0.1

-

-

試劑一

50

50

-

-

充分振蕩混勻,使土樣全部潮濕,室溫放置15min

-

-

試劑二

500

500

-

-

試劑三

400

-

-

-

充分混勻,置于37℃水浴鍋或37℃恒溫培養(yǎng)箱反應(yīng)1h后,立即沸水浴5min(蓋緊,纏封口膜,防止水分散失),流水/冰浴冷卻。

-

-

試劑三

-

400

-

-

10000rpm,25℃離心10min,取上清液待測(cè)

-

-

上清液

500

500

-

-

標(biāo)準(zhǔn)品

-

-

500

-

蒸餾水

-

-

-

500

試劑四

1000

1000

1000

1000

充分混勻,溫靜置2min后,吸取1mL反應(yīng)液于1mL玻璃比色皿中,測(cè)定吸光值A,分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A 測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需檢測(cè)1-2次。

三、S-ASF活力計(jì)算

單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol對(duì)-硝基苯*定義為一個(gè)酶活力單位。

S-ASF活力(U/g 土樣)=ΔA測(cè)定÷ (ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V反總÷W÷T=2.28×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24dV反總:反應(yīng)體系總體積:9.5×10-4L;C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,100μmol/L;W:樣本質(zhì)量,g

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

1、 分別稱取兩管0.1g三葉草土樣,分別記為測(cè)定管和對(duì)照管,按照測(cè)定步驟操作,1mL玻璃比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.627-0.108=0.519,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.568-0.002=0.566,計(jì)算酶活得:

S-ASF活力(U/g 土樣) =0.456×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=2.28×0.519÷0.566÷0.1=20.9067 U/g 土樣。

2、 分別稱取兩管0.1g土樣,分別記為測(cè)定管和對(duì)照管,按照測(cè)定步驟操作,1mL玻璃比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.442-0.102=0.34,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.568-0.002=0.566,計(jì)算酶活得:

S-ASF活力(U/g 土樣) =0.456×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=2.28×0.34÷0.566÷0.1=13.69611 U/g 土樣。

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC4030/BC4035  土壤β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖苷酶(S-C1)活性檢測(cè)試劑盒

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土壤芳基硫酸酯酶活性檢測(cè)試劑盒 土壤芳基硫酸酯酶活性檢測(cè)試劑盒


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