品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC4020 |
規(guī)格 | 50T/24S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 土壤亮*酸氨基肽酶(S-LAP)活性檢測 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
土壤亮*酸氨基肽酶(S-LAP)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號:BC4020
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑二:臨用前取1瓶加入3 mL丙 酮溶解,用不完的試劑2-8℃保存一周。
產(chǎn)品說明:
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮*酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
S-LAP分解L-亮*酸對硝基 苯胺生成對硝基 苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、天平、離心機、水浴鍋、研缽、甲苯(不允許快遞)、丙 酮(不允許快遞)、30-50目篩、蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
取新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘干,過30-50目篩。
二、測定步驟
分光光度計預(yù)熱30min以上,波長調(diào)至405nm,蒸餾水調(diào)零。
加樣表:
測定管 | 對照管 | |
風(fēng)干土樣(g) | 0.1 | 0.1 |
甲苯(μL) | 50 | 50 |
震蕩混勻,室溫靜置15min。 | ||
試劑一(μL) | 850 | 850 |
試劑二(μL) | 100 | - |
置于30℃水浴鍋準(zhǔn)確反應(yīng)1h后,立刻煮沸5min(蓋緊,纏封口膜,防止崩開水分散失)。流水冷卻至室溫。 | ||
試劑二(μL) | - | 100 |
14000g,常溫離心10min,取上清于405nm處測定吸光值,分別記為A測定管、A對照管,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。 |
實驗實例:
稱取兩管0.1g三葉草土樣,分別記為測定管和對照管,按照測定步驟操作,計算ΔA=A測定管-A對照管=0.982-0.223=0.759,計算酶活得:S-LAP活性(U/g土樣)=1.689×ΔA÷W=1.689×0.759÷0.1=12.8195 U/g土樣。
稱取兩管0.1g土樣,分別記為測定管和對照管,按照測定步驟操作,計算ΔA=A測定管-A對照管=0.812-0.141=0.671,計算酶活得:S-LAP活性(U/g土樣)=1.689×ΔA÷W=1.689×0.671÷0.1=11.3332 U/g土樣。
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