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  • NADP磷酸酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
  • NADP磷酸酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品名稱:

NADP磷酸酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-30
儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
NADP磷酸酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
NADP Phosphatase(NADPase) Activity Assay Kit
別名
NADP磷酸酶試劑盒 NADPase Kit NADP磷酸酶(NADPase)試劑盒 NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Micro

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號(hào)BC1115
規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途測(cè)定意義:NADPase主要存在于植物組織中,是生物體內(nèi)催化NADP+降解為應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合


NADP磷酸酶(NADPase活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
貨號(hào): BC1115
規(guī)格: 100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體50 mL×1瓶2-8℃保存
試劑液體15 mL×1瓶2-8℃保存
試劑粉劑×22-8℃保存
試劑粉劑×12-8℃保存
試劑粉劑×12-8℃保存
試劑五液體8 mL×1瓶常溫保存
標(biāo)準(zhǔn)品1 mL×1 支2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:用時(shí)加入1.1 mL試劑一充分溶解備用,現(xiàn)配現(xiàn)用。

  2. 試劑三:用時(shí)加入8 mL雙蒸水,溶解后2-8℃可保存一周。

  3. 試劑四:用時(shí)加入8 mL雙蒸水,溶解后2-8℃可保存一周。

  4. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液。將標(biāo)準(zhǔn)品10倍稀釋,即取1 mL標(biāo)準(zhǔn)品加9 mL蒸餾水,充分混勻,配成1 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液

  5. 定磷試劑的配制:按H2O試劑三試劑四試劑五=2:1:1:1的比例配制,配好的定磷試劑應(yīng)為淺黃色,若無色則試劑失效,若是藍(lán)色則為磷污染,定磷試劑根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量現(xiàn)用現(xiàn)配。

注意:配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
產(chǎn)品說明:
NADPase主要存在于植物組織中,是生物體內(nèi)催化NADP+降解為NAD+的酶,與NADK一起調(diào)控NADNADP之間的平衡。
NADPase能夠催化NADP+水解為NAD+和無機(jī)磷的反應(yīng),通過測(cè)定無機(jī)磷的量來測(cè)定NADPase活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、勻漿器/研缽和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1肝加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清之后按照測(cè)定步驟操作,使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.265-0.254=0.011,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.533-0.047=0.486,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得

NADPase (U/g質(zhì)量) =0.25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.25×0.011÷0.486÷0.1=0.057 U/g質(zhì)量。

  1. 取0.1g狗尾巴草(塊根)加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清之后按照測(cè)定步驟操作,使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.336-0.107=0.229,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.533-0.047=0.486,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得

NADPase (U/g質(zhì)量) =0.25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.25×0.229÷0.486÷0.1=1.18 U/g質(zhì)量。
參考文獻(xiàn):

  1. Kawai S, Mori S, Mukai T, et al. Cytosolic NADP phosphatases I and II from Arthrobacter sp. strain KM: implication in regulation of NAD+/NADP+ balance[J]. Journal of Basic Microbiology: An International Journal on Biochemistry, Physiology, Genetics, Morphology, and Ecology of Microorganisms, 2004, 44(3): 185-196.

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