品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC1155 |
規(guī)格 | 100T/96S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 測定意義:TrxR是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
硫氧還蛋白還原酶(TrxR)活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC1155
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體125 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
試劑四 | 液體30μL×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制:
試劑三:臨用前取1支加入1.667 mL蒸餾水溶解,用不完的試劑-20℃保存2周。
試劑四:體積量少,請離心后再使用。臨用前根據(jù)樣本數(shù)量將試劑四用無水乙醇稀釋10倍后使用。
產(chǎn)品說明:
TrxR(EC,EC 1.8.1.9)是一種NADPH依賴的包含FAD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類似,催化*還原生成GSH,是谷*甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。
TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412nm有特征吸收峰,但還原型谷*甘肽與DTNB同樣能反應(yīng)生成TNB,因此本試劑盒利用2-乙烯吡啶抑制樣本中原有的還原型谷*甘肽,通過測定412nm波長處TNB的增加速率,即可計算TrxR活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機、可調(diào)節(jié)移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、蒸餾水、冰和無水乙醇。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:
哺乳動物組織及血液制品TrxR活力測定時,一般須用蒸餾水稀釋5倍左右;測定過程操作須迅速。
由于試劑一中含有一定濃度的蛋白(約0.1mg/mL),所以在測定樣本蛋白濃度時需要減去提取液本身的蛋白含量。
實驗實例:
取0.1g月季花朵加入1mL 試劑一進行冰浴勻漿,10000rpm,4℃離心10min,取上清置冰上,按照測定步驟操作,用微量玻璃比色皿測得計算ΔA =(A2測定-A1測定)-(A2空白-A1空白)=(0.8600-0.8177)-(0.0792-0.0727)=0.00358,按樣本質(zhì)量計算酶活得:
TrxR活性(U/g 質(zhì)量)=147×ΔA÷W=53.626 U/g 質(zhì)量。
取0.1g小鼠肝臟樣本加入1mL 試劑一進行冰浴勻漿,10000rpm,4℃離心10min,取上清稀釋4倍置冰上,按照測定步驟操作,用微量玻璃比色皿測得計算ΔA =(A2測定-A1測定)-(A2空白-A1空白)=(0.8538-0.2101)-(0.0792-0.0727)=06371,按樣本質(zhì)量計算酶活得:
TrxR(U/g 質(zhì)量)=147×(ΔA測定管-ΔA空白管)÷W×4(稀釋倍數(shù))=3746.148 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻:
Li B, Li D, Jing W, et al. Biogenic selenium and its hepatoprotective activity[J]. Scientific reports, 2017, 7(1): 1-11.
Zhang L, Fan J, He J, et al. Regulation of ROS–NF‐κB axis by tuna backbone derived peptide ameliorates inflammation in necrotizing enterocolitis[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(8): 14330-14338.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1170/ BC1175 還原型谷*甘肽(GSH)含量檢測試劑盒
BC1180/ BC1185 氧化型谷*甘肽(*)含量檢測試劑盒
BC1190/ BC1195 谷*甘肽過氧化物酶(GPX)活性檢測試劑盒
BC0350/ BC0355 谷*甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)活性檢測試劑盒
硫氧還蛋白還原酶活性檢測試劑盒 微量法 硫氧還蛋白還原酶活性檢測試劑盒 微量法