品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC1255 |
規(guī)格 | 100T/96S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 測定意義: 葡萄糖不僅是細胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產(chǎn)物是生物合成的 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
L-半乳糖酸-1,4-內(nèi)酯脫氫酶
(Gal LDH)活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC1255
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑一:臨用前加入16 mL蒸餾水,充分溶解;
試劑二:臨用前加入2 mL蒸餾水,充分溶解。
產(chǎn)品說明:
L-半乳糖途徑是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內(nèi)膜,負責催化植物體內(nèi)AsA生物合成的最后一步,也是該途徑的關(guān)鍵酶之一,對植物體內(nèi)AsA含量的積累起著至關(guān)重要的作用。
Gal LDH催化L-半乳糖內(nèi)酯還原氧化型細胞*C(Cyt c),還原型Cyt c在550nm有吸收峰;測定還原型Cyt c增加速率,來計算Gal LDH活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項:
1、在測定酶活時要注意溫度。建議取小燒杯一只裝入一定量的25℃蒸餾水,將此燒杯放入25℃水浴鍋中,在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中;若使用96孔板,反應(yīng)期間應(yīng)放入25℃培養(yǎng)箱中。
2、建議兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結(jié)果的準確性。
3、加入最后一種試劑后需迅速混勻并測定OD值。
實驗實例:
取0.1g土豆加入1mL提取液冰上充分研磨,13000g 4℃離心10min,取上清液置冰上,按照測定步驟操作,用微量比色皿測得計算ΔA測定管=A4-A3=0.9253-0.7844=0.1409,ΔA空白管=A2-A1=0,按樣本質(zhì)量計算酶活得:Gal LDH(U/g 質(zhì)量)=0.289×(ΔA測定管-ΔA空白管) ÷W=0.4072 U/g 質(zhì)量。
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