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  • 大鼠骨髓淋巴細胞分離液試劑盒
產(chǎn)品名稱:

大鼠骨髓淋巴細胞分離液試劑盒

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-07-29
大鼠骨髓淋巴細胞分離液試劑盒
貨號:P6030
規(guī)格:200ml/KIT
保存 :室溫避光儲存,有效期少 2 年。

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶

大鼠骨髓淋巴細胞分離液試劑盒
貨號:P6030
規(guī)格:2×100ml/kit
保存:室溫避光儲存,有效期少 2 年。


試劑盒內(nèi)容:

試劑:全血及組織稀釋液 100ml
試劑:細胞洗滌液       100ml
試劑C                  100ml
試劑F                  100ml
說明書                 1 份


一、  各種動物骨髓細胞的采集方法
    1. 大鼠、小鼠骨髓的采集:用頸椎脫臼法處死動物,剝離出胸骨或股骨,用注射器吸取少量的F 液,沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液,以500g(約1800 轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘,棄上清。沉淀以F 液重復洗滌一次后用全血及組織稀釋液懸起(細胞濃度為2×10 8 -1×10 9 個/ml),備用。
   2. 大動物骨髓的采集:
    A.骨髓穿刺點定位
  (1)胸骨:穿刺部位在胸骨中線,胸骨體與胸骨柄連接處,或選胸骨上1/3 部。
  (2)脛骨:穿刺部位在脛骨內(nèi)側(cè),脛骨上端的下方1 厘米處。
  (3)肋骨:穿刺部位在第5~7 肋骨各自的中點上。
  (4)髁骨:穿刺部位在髁前上棘后2~3 厘米的髁嵴。
  (5)股骨:穿刺部位在股骨內(nèi)側(cè)面,靠下端的凹面處。
B.骨髓穿刺方法
  (1)實驗動物按要求固定,穿刺部位去毛、消毒、麻醉,要求局部麻醉范圍直達骨膜,也可作全麻。
  (2)操作人員帶消毒手套,確定穿刺點,估計從皮膚到骨髓的距離并依此固定骨髓穿刺針長度。左手拇、食指繃緊穿刺點周圍皮膚,右手持穿刺針在穿刺點垂直進針,小弧度左右旋轉(zhuǎn)鉆入,當有落空感時表示針尖已進入骨髓腔。用左手固定穿刺針,右手抽出針芯,連接注射器緩慢抽吸骨髓組織,當注射器內(nèi)抽到少許骨髓時立即停止抽吸,收集骨髓細胞加入4-5ml F 液混勻,以500g(約1800 轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘,棄上清,沉淀以F 液重復洗滌兩次后用全血及組織稀釋液懸起(細胞濃度為2×10 8 -1×10 9  個/ml),備用。
 (3)左手壓住穿刺點周圍皮膚,迅速拔出穿刺針,用棉球壓迫數(shù)分鐘。如穿刺的是肋骨,除壓迫止血外,還需膠布封貼穿刺點,防止發(fā)生氣胸。


3. 人骨髓的采集:
   臨床方法收集骨髓細胞加入4-5ml F液混勻,以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心20分鐘,棄上清,沉淀以F液重復洗滌兩次后用含20%胎牛血清的全血及組織稀釋液懸起(細胞濃度為2×10 8 -1×10 9 個/ml),備用。


二、骨髓淋巴細胞分離方法
    1.取 1ml 骨髓細胞懸液(制備方法詳見“一、骨髓細胞的采集方法”)小心疊加在C 液之液面上(比例為1:1),20℃±2℃,400g(約1500 轉(zhuǎn)/分),離心20 分鐘(半徑15cm 水平轉(zhuǎn)子)。此時離心管中由上下細胞分四層。*層;為稀釋液層。第二層;為環(huán)狀乳白色含所需淋巴細胞層。第三層;為透明分離液層。第四層;為紅細胞層。收集第二層細胞放入含細胞洗滌液4-5 毫升的試管中,充分混勻后,以500g(約1800 轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘。沉淀經(jīng)反復洗滌2 次即得所需淋巴細胞。
   注: 提取率約為80%。
分離圖例:


三、  注意事項
    A. 本分離液是敏光型的,在運輸和貯藏過程中應在18℃-25℃避光保存,啟封后置4℃保存避免微生物污染。另外,本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
    B. 待分離的樣本要求新鮮,避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在20℃水浴箱中復溫20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時分離效果好,且所有操作過程一定要在無菌條件下進行。

    C. 由于各品牌離心機的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時間,摸索的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。
    D. 好使用無靜電反應的離心管,推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。

 

四、產(chǎn)品性能指標

pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
內(nèi)毒素 ≤0.5EU/ml
無菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下
五、貯藏及保存期限
18℃-25℃避光保存,有效期兩年。啟封后置4℃保存,有效期一周。
注:若保證無微生物污染,啟封后可置4℃長期保存。但應注意保存溫度較低時本分離液易
出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

 

大鼠骨髓淋巴細胞分離液試劑盒訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


運輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。

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