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  • 二胺氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
  • 二胺氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品名稱:

二胺氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-29
儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
二胺氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Diamine Oxidase(DAO) Activity Assay Kit
別名
二胺氧化酶試劑盒 二胺氧化酶測(cè)試盒
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號(hào)BC1285
規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途測(cè)定意義:DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合


二胺氧化酶(DAO)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào):BC1285
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體2 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體25 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體5 mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品液體140 μL×1支2-8℃保存

溶液的配制:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品:臨用前取102 μL加入898μL蒸餾水得到1mol/L(即1000μmol/mL)的過(guò)氧化*溶液,2-8℃保存4周。
2. 0.5μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:取20μL 1000μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液和980μL蒸餾水混合配成20μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液;再取25μL 20μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液和975μL蒸餾水混合配成0.5μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
產(chǎn)品說(shuō)明:
DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物(腸黏膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白質(zhì)合成密切相關(guān),能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損程度。
DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過(guò)氧化氫,H2O2氧化亞鐵*中的Fe2+生成Fe3+,F(xiàn)e3+進(jìn)一步與4-氨基安*比林和酚反應(yīng)生成紅色醌類(lèi)化合物,在505nm處有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定505nm處的吸光值來(lái)計(jì)算DAO的活性。

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

  1. 稱取0.1009g竹葉樣本,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿,10000g 4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè),之后按照測(cè)定步驟,用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=1.0176-0.4116=0.6060,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管


-A空白管=0.3557-0.0767=0.279;按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:
DAO活性 (U/g 質(zhì)量) = 0.5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W×F =10.763 U/g 質(zhì)量

  1. 稱取0.1000g十二指腸樣本,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿,10000g 4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè),之后按照測(cè)定步驟,用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.2336-0.1803=0.0533,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.3557-0.0767=0.279;按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

DAO活性 (U/g 質(zhì)量)= 0.5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W×F =0.955 U/g 質(zhì)量
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