品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號(hào) | BC2770 |
規(guī)格 | 50T/48S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 血鉀濃度檢測(cè) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
血鉀濃度檢測(cè)試劑盒說
明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào):BC2770
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二A | 液體6mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二B | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)液 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑一工作液:臨用前按試劑一(mL):濃硫酸(μL)=5:12的比例按需配制;
試劑二:臨用前配制,取1瓶試劑二B加入2.8mL試劑二A,混勻,2-8℃可保存1周;
標(biāo)準(zhǔn)液:2 μmol/mL鉀標(biāo)準(zhǔn)液。
產(chǎn)品說明:
鉀保持機(jī)體的正常滲透壓及酸堿平衡,參與糖及蛋白代謝,保證神經(jīng)肌肉的正常功能。血清鉀高于5.5mmol/L時(shí)稱高血鉀,高血鉀可使神經(jīng)、肌肉應(yīng)激性增高,使心肌應(yīng)激性降低,導(dǎo)致心動(dòng)過緩,血清鉀超過10mmol/L時(shí),可發(fā)生心室纖顫,甚至心臟在舒張期停跳。血清鉀低于3.5mmol/L時(shí)稱低血鉀,低血鉀可引起肌無力甚至肌肉弛緩性麻痹,引起心肌應(yīng)激性增高,出現(xiàn)心動(dòng)過速、心律紊亂甚至在收縮期停跳。因此血清鉀是常用的生化測(cè)定指標(biāo)。
血清中鉀離子與四苯硼鈉作用,形成不溶于水的四苯硼鉀,產(chǎn)生的濁度在一定范圍內(nèi)與鉀離子濃度成正比。通過測(cè)定其濁度來測(cè)定血清鉀含量。
技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.0095 μmol/mL
線性范圍:0.05-1.5 μmol/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、濃硫酸和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
血清預(yù)處理:取EP管,依次加入50μL血清,450μL試劑一工作液,充分混勻后室溫(25℃左右),8000rpm,離心10min,取上清液,待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到520nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于25℃水浴中預(yù)熱30min以上。
3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:取100μL 2 μmol/mL鉀標(biāo)準(zhǔn)液,加入400μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.4 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用,現(xiàn)用現(xiàn)配。(實(shí)驗(yàn)中每管需要200μL,為減小實(shí)驗(yàn)誤差,故配制大體積。)
4. 操作表:
試劑名稱(μL) | 空白管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
蒸餾水 | 200 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)液 | - | - | 200 |
上清液 | - | 200 | - |
試劑二 | 100 | 100 | 100 |
混勻后靜置5 min | |||
試劑三 | 700 | 700 | 700 |
混勻后于520 nm立即測(cè)定吸光度,分別記A空白管、A測(cè)定管、A標(biāo)準(zhǔn)管。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)1-2次。 |
三、血鉀濃度計(jì)算
血鉀濃度(μmol/mL)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]×樣本稀釋倍數(shù)
=4×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)液:0.4μmol/mL;樣本稀釋倍數(shù):(50μL血清+450μL試劑一)÷50μL血清=10。
注意事項(xiàng):
1、采血后宜盡早進(jìn)行血清鉀測(cè)定,時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)影響血清鉀含量。
2、如果樣本吸光值大于1.2,建議將樣本用試劑一工作液稀釋后進(jìn)行測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
取小鼠血清按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得A測(cè)定管=0.636,A空白管=0.012,A標(biāo)準(zhǔn)管=0.397,計(jì)算得:
血鉀濃度(μmol/mL)=4×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)=6.48 μmol/mL。
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