磷酸烯醇式酸羧化酶（PEPC）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
紫外分光光度法
貨號(hào)：BC2190
規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品說(shuō)明：
磷酸烯醇式*酸羧化酶（EC 4.1.1.31）廣泛存在于植物和微生物中，在動(dòng)物及絲狀霉菌中缺乏此酶。是催化 磷酸烯醇式*酸與二氧化碳反應(yīng)生成草酰乙酸呈不可逆反應(yīng)的酶，同時(shí)也是 C4 植物和 CAM 植物固定 CO2 的 關(guān)鍵酶，對(duì)三羧酸循環(huán)的運(yùn)轉(zhuǎn)起重要調(diào)節(jié)作用。 PEPC 催化磷酸烯醇式*酸和 CO2 生成草酰乙酸和 HPO4 2-，蘋果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和 NADH 生 成蘋果酸和 NAD+，在 340nm 測(cè)定 NADH 減少速率，計(jì)算 PEPC 活性。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、1mL 石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰 和蒸餾水。

注意事項(xiàng)：

1. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取 1-2 個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，ΔA 大于 0.6 時(shí)，建議將粗酶液用提取液稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，當(dāng) ΔA 小于 0.01 時(shí)，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（10min 或 15min）來(lái)測(cè)定。

2.  空白管為檢測(cè)各試劑組分質(zhì)量的檢測(cè)孔，正常情況下，變化不超過(guò) 0.02。

參考文獻(xiàn)：
[1] Zhang Y H, Wang Z M, Huang Q, et al. Phosphoenolpyruvate carboxylase activity in ear organs is related to protein concentration in grains of winter wheat[J]. Journal of cereal science, 2008, 47(2): 386-391.
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