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  • BCA  微量蛋白濃度測定試劑盒
產(chǎn)品名稱:

BCA 微量蛋白濃度測定試劑盒

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-07-29
BCA 微量蛋白濃度測定試劑盒

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶

BCA  微量蛋白濃度測定試劑盒說明書
貨號:PC0050
規(guī)格:500 微孔(500T)/1000 微孔(1000T)/2000 微孔(2000T)
保質(zhì)期:本試劑盒自訂購之日起一年內(nèi)有效。
產(chǎn)品內(nèi)容:
包裝 500  微孔 1000  微孔 2000  微孔 保存
BCA 試劑 100ml 2×100ml 4×100ml 室溫
Cu 試劑 3ml 6ml 12ml 室溫
PBS 稀釋液 30ml 60ml 120ml 室溫
BSA 蛋白標(biāo)準(zhǔn) (5mg/ml BSA) 0.3ml 0.5ml 1ml -20℃
產(chǎn)品簡介:
堿性條件下,蛋白將Cu 2+ 還原為Cu + , Cu + 與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物,測定其在 562nm處的吸收
值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢
測結(jié)果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋
液或裂解液本身背景值較高,可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明:
一 . 微孔酶標(biāo)儀法
1. 配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量,按 50 體積 BCA 試劑加 1 體積 Cu 試劑(50:1)配制成 BCA
工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA 工作液室溫 24 小時內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:先用 PBS 將 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋終濃度為 0.8mg/ml 備用。再依次稀釋 80、40、20、
10、5、2.5ug/ml.。
3. 高濃度蛋白可將樣品作適當(dāng)稀釋(多做幾個梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀釋) ,由于移液器
在取小量時的誤差,標(biāo)準(zhǔn)線前面的點可能不很準(zhǔn)確,所以盡可能的讓樣品點落在標(biāo)準(zhǔn)線 1/2 后。
4. 各孔加入 200 微升 BCA 工作液和 40ul 稀釋后的蛋白或標(biāo)準(zhǔn)品溶液,對照孔加入 PBS 稀釋液。37
℃放置 4 小時。用酶標(biāo)儀測定 A562nm,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時,應(yīng)注意防止因水
分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。
二 . 分光光度計法
如沒有酶標(biāo)儀,在離心管中混勻樣品后加入比色皿,用分光光度計比色。
采用分光光度計測定蛋白濃度方法與酶標(biāo)儀法相似, 只需要按照分光光度計比色皿容量要求按照比例
配置相應(yīng)的 BCA 工作液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
常規(guī)比色皿用量為 200ul 有樣本加入 1mlBCA 工作液或 400ul 樣本加入 2mlBCA 工作液。微量比色皿
用量為 20 樣本加入 100ul BCA 工作液?;蚋鶕?jù)儀器情況自行調(diào)整。
附:樣本及標(biāo)準(zhǔn)品稀釋示意圖
樣本管號  A  B  C  D  E
PBS 稀釋液用量  180  100  100  100  ……
標(biāo)準(zhǔn)品用量  20(原液) 100(從 A 管吸出) 100(從 B 管吸出) 100(從 C 管吸出) ……
終濃度(ug/ml) 80  40  20  10  ……
注意事項:
1. 長期不用時,Cu 試劑與 PBS 稀釋液可置于 2-8℃保存,如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染則應(yīng)丟棄。BCA 試劑在低
溫條件下出現(xiàn)結(jié)晶沉淀時,可 37℃溫育使其*溶解, 不影響使用。
2. 樣品中若含有較多干擾物質(zhì)時,請采用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
相關(guān)產(chǎn)品:
PC0001 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品( 5mg/ml )
PC0015 5×G250( 蛋白定量用 )
PC0021 BCA 試劑
PC0030 Lowry 法蛋白濃度測定試劑盒
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PR1600  預(yù)染低分子量蛋白 MARKER
R0050  核蛋白抽提試劑盒
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P1300  SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒
D1060  10× 電泳轉(zhuǎn)移緩沖液
PE0010 ECL Plus 熒光檢測試劑 (ECL 超敏發(fā)光液 )

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