品牌 | SOLARBIO/索萊寶 |
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離子交換填料 SP-瓊脂糖凝膠 HP
貨號(hào):S9220
規(guī)格:50ml
保存:4℃~25℃,有效期5年。
一、簡(jiǎn)介
CM-瓊脂糖凝膠 FF 是將羧甲基鍵合在高流速瓊脂糖凝膠上形成的一種弱陽(yáng)離子交換介質(zhì)。廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
本品為白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。
二、親和填料特性
項(xiàng) 目 | 指 標(biāo) |
離子交換基團(tuán) | -CH 2 N + (CH 3 ) |
離子交換類型 | 強(qiáng)陰離子,可交換離子 Cl |
基 質(zhì) | 6% 交聯(lián)瓊脂糖 |
蛋白質(zhì)吸附容量 | 120mgHSA/ml 介質(zhì) |
總離子交換量 | 0.18-0.25mmol/ml 介質(zhì) |
形狀 | 球形 |
粒徑 | 45~165µm |
流速 | 400~700 cm/h* 大流速 750 cm/h |
工作溫度 | 4~40 ℃ |
耐壓 | 0.3MPa |
耐熱 | pH7 水中 120℃30min |
pH 值穩(wěn)定性 | 4~13(長(zhǎng)時(shí)間) |
pH 工作范圍 | 6~10 |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 在以下液體中穩(wěn)定:所有常用的水相緩沖液; 1mol/L 氫氧化鈉;8mol/L 尿素;6mol/L 鹽酸 胍;70% 乙醇 |
*檢測(cè)條件: 層析柱 10mm×300mm *柱床高 15cm,25℃,流動(dòng)相為 0.1mol/LNaCl。.
三、 適用范圍
本產(chǎn)品具有高化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、高載量、好的機(jī)械性能、可在位清洗、多次重復(fù)使用等特點(diǎn),非特異性吸附低,回收率高,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),適用于在 pH 工作范圍內(nèi)可形成正離子的生物大分子的分離純化,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
四、操作說(shuō)明
1 裝柱
(1)讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。
(2)根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠,清洗掉 20%乙醇,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
(3) 將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位 (液面略高于濾膜) , 務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
(4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
(5)打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的 1.33 倍的流速流過(guò),使柱床穩(wěn)定。用 2~3 倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2 平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過(guò)柱子, 到流出液電導(dǎo)和 pH 不變。 平衡液是低濃度的緩沖溶液, 如 NaAC、PBS 等。
3 上樣
(1)樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。
(2)一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,用平衡液洗去雜質(zhì),再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
(3)介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和 pH 值。鹽濃度小,介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附較牢。用 CM 介質(zhì)時(shí),推薦的 pH 值是小于目標(biāo)產(chǎn)品等電點(diǎn) 1 個(gè)單位。
4 洗脫
CM 介質(zhì)可用增大鹽濃度或增大 pH 值進(jìn)行洗脫,常用增大鹽濃度的辦法洗脫。
5 再生
一般用高鹽濃度的緩沖液(含 1~2mol/L NaCl)洗或增大 pH 洗 10 倍以上柱體積,接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
6 在位清洗
(1)對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用 2M Nacl 去除。
(2)對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可用 1M NaOH 去除。
(3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,用 4~10 倍柱體積的 70%乙醇或 30%異丙醇清洗,但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后,用少 3 倍緩沖液平衡柱子。
7 注意
在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,要避免柱子流干,氣泡進(jìn)入。
8 去熱源
用 0.5M 的氫氧化鈉清洗柱子 5~6 小時(shí)或用 0.1M 的氫氧化鈉 24 小時(shí)?;蛴靡韵路椒ú襟E去除:
(1)2 倍柱體積的 70%乙醇;
(2)2 倍柱體積 50mM Tris-Hcl pH7.5;
(3)1 倍柱體積 4M 尿素;
(4)3 倍柱體積的 Tris 緩沖液+0.1M Nacl;
以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。
9 消毒
用 0.5~1M NaOH 室溫下洗 8~10 倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。
10 滅菌
置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中 120℃下 30 分鐘。
五、注意事項(xiàng)
產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在 4℃~25℃(保存溶液為 20% 乙醇) ,通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過(guò)的柱子貯存在 4℃(20% 乙醇) 。避免與氧化劑接觸;避免在 pH< 4 的環(huán)境中長(zhǎng)時(shí)間暴露(一周,20℃)。
離子交換填料 SP-瓊脂糖凝膠 HP訂購(gòu)說(shuō)明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。