游離膽*醇（FC）含量檢測試劑盒說明書
微量法

注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC1895
規(guī)格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液：自備異丙醇，大約需要110mL，常溫保存；試劑盒內提供一個30mL棕色空瓶，僅做分裝使用，請自行標注試劑名稱。

2. 標準品：10 mg膽*醇，臨用前加入517 μL提取液，振蕩溶解，即為50 μmol/mL的膽*醇標準品，2-8℃可保存4周。

3. 工作液的配制：根據樣本量將試劑一：試劑二按3 mL：20 μL（約16T）的比例配制工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

產品說明：
FC是構成細胞膜的主要成分，也是合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。測定原理：FC氧化酶催化FC生成4-膽甾烯酮和H₂O₂，過氧化物酶催化H₂O₂、4-氨基安*比林和酚生成紅色醌類化合物，在500nm有吸收峰，其顏色深淺與FC含量成正比。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、天平、低溫臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、可調式移液槍、EP管、冰、蒸餾水、異丙醇（AR，98%）。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

相關發(fā)表文獻：

1. Qin Yuan,Shang Lin,Yuan Fu,et al. Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus). International Journal of Biological Macromolecules. April 2019;127:178-186.

2. Huan Guo,Shang Lin,MinLua Jia,et al. Characterization, in vitro binding properties, and inhibitory activity on pancreatic lipase of β-glucans from different Qingke (Tibetan hulless barley) cu ltivars. International Journal of Biological Macromolecules. December 2018;

3. Yao L, Chen S, Li W. Fatostatin inhibits the development of endometrial carcinoma in endometrial carcinoma cells and a xenograft model by targeting lipid metabolism[J]. Archives of Biochemistry and Biophysics, 2020: 108327.

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