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培養(yǎng)基現(xiàn)貨原代神經(jīng)細胞懸液的制備方法

發(fā)布日期: 2014-12-12
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1、培養(yǎng)基取出生后1-3天內(nèi)的大鼠腦組織后,先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗12次后,置于3050倍的Hanks液中,腦組織比較柔軟,反復(fù)吹打即可制成細胞懸液。

2、為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立510分鐘后,細胞或細胞團塊自然下沉,脂肪等雜物易漂浮于懸液表層,吸除上清,如此反復(fù)二三次可獲得較多的細胞成分。 

3、向末次沉淀物中加入適量培養(yǎng)基營養(yǎng)液,通過紗網(wǎng)或紗布濾過,計數(shù)細胞并調(diào)整好細胞密度,接種入培養(yǎng)瓶或皿中,置5CO2溫箱中培養(yǎng)。

4、細胞生長匯合后,可用0.25%胰蛋白酶消化法做傳代處理,加消化液的量以能覆蓋細胞層即可,待細胞開始從瓶壁脫離(平均510分鐘),加入含有血清培養(yǎng)基液,吹打制成細胞懸液。

 

 

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