溴代十六烷基*胺簡(jiǎn)稱: CTAB,英文名稱Cetyltrimethylammonium bromide, 又稱鯨蠟烷*基溴化銨,十六烷基*基溴化銨,白色粉末狀,是一種季銨鹽溶于水,在酸性溶液中保持穩(wěn)定。是一種陽(yáng)離子去垢劑,用于從大量產(chǎn)生粘多糖的有機(jī)體如植物以及某些革蘭氏陰性菌(包括E.coli的某些株)中制備純化DNA 。
CTAB結(jié)構(gòu)式
原理:CTAB是一種陽(yáng)離子去污劑,具有從低離子強(qiáng)度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性,在這種條件下,蛋白質(zhì)和中性多聚糖仍留在溶液里,在高離子強(qiáng)度的溶液里,能夠與蛋白質(zhì)和大多數(shù)酸性多聚糖以外的多聚糖形成復(fù)合物,只是不能沉淀核酸,從而將核酸分離出來(lái)。
使用方法:
1.提取DNA配方:
CTAB 4g
NaCl 16.364 g
1M Tris-HCl 20 mL( PH8.0)
冷卻后0.2-1%(400ul)氯仿-異戊醇(24:1):先加96ml氯仿,再加4ml異戊醇,搖勻即可。
2.提取RNA配方
2% CTAB(W/V)
2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)
100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配制)
25mM EDTA
由于在高溫滅菌條件下,Tris-HCl要和DEPC發(fā)生反應(yīng),所以配RNA提取緩沖液時(shí)直接用DEPC 處理的水
使用注意事項(xiàng):CTAB有毒,半數(shù)致死量(大鼠,靜脈)44mg/kg。具有刺激性,若吸入、攝入或皮膚吸收,會(huì)對(duì)人體有害。使用時(shí)要戴合適的手套和防護(hù)眼鏡(或在通風(fēng)櫥操作),避免吸入其粉塵