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簡(jiǎn)述瑞士-姬姆薩染色液的步驟

發(fā)布日期: 2016-04-21
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瑞氏-姬姆薩染色液是利用Romanowsky??Stain?技術(shù)原理改良而成的。主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。姬姆薩染色液對(duì)胞漿著色力較強(qiáng),能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,著色清晰,色澤純正,但是對(duì)胞核著色偏深,核結(jié)構(gòu)顯示較差。
瑞氏-姬姆薩染色液原理
瑞氏-姬姆薩染色液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色,它是利用Romanowsky??Stain?技術(shù)原理改良而成的。細(xì)胞的著色過程是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過程,此過程既有物理吸附作用,又有化學(xué)親和作用。各種細(xì)胞及細(xì)胞的各種成分由于其化學(xué)性質(zhì)不同,對(duì)瑞氏-姬姆薩染色液中的酸性染料(曙紅)和堿性染料(亞甲藍(lán))的親和力也不一樣。因此,標(biāo)本涂片經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色液染色后,相應(yīng)各類細(xì)胞呈現(xiàn)不同的著色,從而達(dá)到辨別其形態(tài)特征的目的。
使用方法:
本產(chǎn)品可作為多種組織或細(xì)胞的染色使用,不同組織、細(xì)胞,不同的用途可以有不同的使用方法。具體方法請(qǐng)根據(jù)自己需求參考既有文獻(xiàn),本產(chǎn)品以涂片為例,舉例說(shuō)明,僅供參考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏-姬姆薩染液2-3滴覆蓋整個(gè)標(biāo)本涂片,染1-2分鐘。
3、滴加等量的0.01M磷酸氫二鈉溶液,輕輕晃動(dòng)玻片, 與瑞氏-姬姆薩染色液充分混勻,染色3-5分鐘。
4、水洗、吸干、鏡檢。
5、染色后胞漿和胞核的染色清晰分明,細(xì)胞核著色呈深淺不同的紫紅色,胞漿呈淺紅色,胞漿中顆粒區(qū)分明顯。
注意事項(xiàng):
1、涂片厚薄適宜,涂片干透后固定,否則細(xì)胞在染色過程中容易脫落。
2、所加染液不能過少,以免蒸發(fā)而使染料沉淀。沖洗時(shí)間不能過久,以防脫色。
3、染色對(duì)pH十分敏感,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)接近中性,否則可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞染色異常,形態(tài)難以識(shí)別,甚錯(cuò)誤。
4、 染色過淡可以復(fù)染,復(fù)染時(shí)應(yīng)先加緩沖液,然后加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡,也可用甲醇脫色。

瑞氏-姬姆薩染色液是由堿性染料美藍(lán)( Methvlem blue )和酸性染料黃色伊紅( Eostm Y )合稱伊紅美藍(lán) 染料即瑞氏(美藍(lán)-伊紅Y)染料。伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子,無(wú)色部分為陽(yáng)離子,其有色部分為酸性,故稱伊紅為酸性染料。美藍(lán)通常為氯鹽是堿性的,美藍(lán)的中間產(chǎn)物結(jié)晶為三氯化鎂復(fù)鹽,其有色部分為陽(yáng)離子,無(wú)色部分為陰離子,恰與伊紅鈉鹽相反。

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