采血、分離動物血清是疫病監(jiān)測、檢測、診斷和評估免疫效果的一項前提性工作,血清分離質(zhì)量的好壞,直接影響到監(jiān)測結(jié)果,所以掌握畜禽的采血分離血清的方法尤為重要。
一、常用血液采集方法選擇
1、一次性注射器采集
采血量達到采血管容積的1/3為宜,不要超過2/3,使其凝固后自然析出血清,操作不當容易引起溶血。
2、真空采血管(抗凝劑)
可達到快速分離血漿的目的。
3、真空采血管(促凝劑)
可以使血清分離快,分離血清多不易受外界溫度的影響。還可以減少溶血現(xiàn)象的發(fā)生,真空采血管內(nèi)涂有硅酮防止紅細胞黏附于試管壁,如果使用普通的試管,紅細胞附于試管壁離心時紅細胞碎裂易溶血。
二、動物血清的分離
1、采集血液樣品后,傾斜30-45度角放置好。
2、夏天在常溫下即可,冬天要在20-30℃下靜置30-45分鐘,以利血清析出,或者先放在溫水中靜置30分鐘后再進行血清分離,否則不易析出血清。
3、在分離過程中,血樣不可劇烈搖晃以免溶血,條件允許可用離心機4000轉(zhuǎn)/分轉(zhuǎn)速下離心10分鐘或8000轉(zhuǎn)/分速度下離心3-5分鐘立即分離得到血清,不能立即分離的需及時置于25℃以上的地方過夜以便析出血清,將析出血清轉(zhuǎn)移至新的EP管內(nèi)送檢血清。
三、動物血清分離注意事項
1、血清分離的時候,有時把血液離心后會出現(xiàn)血清變成膠凍樣,可能有以下幾點原因:采血后放置時間不夠;動物個體差異;采血時間應在采食前或采食后2小時以后;室溫低,當出現(xiàn)膠凍時可以將膠凍于血凝塊分離,將膠凍放于溫度35°左右的溫箱內(nèi)一段時間膠凍會自動化開或用玻璃棒擠壓膠凍也可析出血清。
2、在采血過程中一定要注意如果用一次性真空管時血液應不間斷地流入管中,一旦血流間斷要另換管,否則不易析出血清。
3、溶血的血清,會影響實驗結(jié)果的準確性,應剔除。