赫斯特?zé)晒馊玖?/a>是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個(gè)供體及一個(gè)受體熒光物分子所組成。
熒光染料是指吸收某一波長(zhǎng)的光波后能發(fā)射出另一波長(zhǎng)大于吸收光的光波的物質(zhì)。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。
熒光染料由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記,其廣泛應(yīng)用于熒光免疫,熒光探針,細(xì)胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。
赫斯特?zé)晒馊玖鲜羌?xì)胞生物學(xué)等科學(xué)研究中*的重要工具,熒光濾色塊是熒光顯微鏡中至關(guān)重要的一個(gè)部件。那么,熒光染料亮度怎么進(jìn)行比較?
1、熒光染料的亮度可以用來比較不同熒光染料的熒光標(biāo)記效果,通過陰性細(xì)胞群與陽性細(xì)胞群的熒光信號(hào)之間的關(guān)系來表示。但陰性細(xì)胞群的熒光信號(hào)受到信號(hào)強(qiáng)度、自發(fā)熒光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個(gè)因素相關(guān)。
2、熒光染料染色指數(shù)是陽性細(xì)胞群的平均熒光強(qiáng)度與陰性細(xì)胞群的平均熒光強(qiáng)度之差與陰性細(xì)胞群熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)差之間比值的一半。熒光染料染色系數(shù)只和抗體克隆與質(zhì)量、熒光團(tuán)純度與質(zhì)量、熒光修飾比、激光線及其功率、長(zhǎng)通和帶通濾光片、目的細(xì)胞等因素相關(guān)。
3、赫斯特?zé)晒馊玖系娜旧笖?shù)與熒光染料的亮度呈正相關(guān),也就是熒光染料亮度越高,染色系數(shù)也就高。