草酸銨結(jié)晶紫染色液是革蘭氏染色法中的一種成分,主要由草酸銨、結(jié)晶紫、乙醇等組成。細(xì)胞經(jīng)草酸銨結(jié)晶紫染色后再經(jīng)Gram碘液處理,形成不溶性復(fù)合物,該復(fù)合物不能通過(guò)細(xì)胞壁,不易被脫色,所以保持紫色。
草酸銨結(jié)晶紫染色液使用說(shuō)明:
1、樣品處理:
?、賹?duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘。換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘。無(wú)水乙醇5分鐘。90%乙醇2分鐘。70%乙醇2分鐘。蒸餾水2分鐘。
?、趯?duì)于冰凍切片:蒸餾水2分鐘。
?、蹖?duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘。
2、結(jié)晶紫染色:
對(duì)于上述處理好的樣品:結(jié)晶紫染色液染色10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。
用蒸餾水或自來(lái)水充分洗滌后即可進(jìn)行觀察和拍照。
注意事項(xiàng):
1、需自備4%多聚甲醛。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,中性樹(shù)膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備70%和90%乙醇,無(wú)水乙醇以及二甲苯。
2、樣品數(shù)量較多時(shí),可以使用染色架和染色缸,便于操作。
3、初次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
4、草酸銨結(jié)晶紫染色液對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
5、為了操作人員的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。