植物蛋白提取試劑盒在利用液氮充分磨碎植物組織的同時,采用特殊的試劑對植物細胞釋放出來的蛋白進行沉淀,并使用蛋白酶抑制劑抑制蛋白酶活性,很大程度地保持所抽提蛋白質(zhì)的完整性;而且蛋白抽提物呈干粉狀,有利于蛋白質(zhì)的長期保存。
植物蛋白提取試劑盒特點:
1、提取的蛋白質(zhì)是包括稀有蛋白在內(nèi)的植物細胞的全蛋白質(zhì);
2、可以進行50×100mg植物組織樣品的提??;
3、經(jīng)過適當(dāng)處理后,可以用于2D電泳、等電點聚焦等實驗;
4、對植物細胞的裂解效果和植物細胞的非蛋白質(zhì)成分去除效果好;
5、不需要超速度離心,可以同時處理多個樣品。
植物蛋白質(zhì)的提取方法基本上有這幾種:鹽析法、有機溶劑法和等電點法。
1、鹽析法
原理:鹽析法是指在溶液中加入大量的無機鹽,可使蛋白溶解度降低沉淀析出。鹽析法主要用于蛋白質(zhì)的分離純化。常作鹽析的無機鹽有硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。
2、有機溶劑法
原理:機溶劑引起蛋白質(zhì)沉淀的主要原因是加入有機溶劑使水溶液的介電常數(shù)降低,因而增加了兩個相反電荷基團之間的吸引力,促進了蛋白質(zhì)分子的聚集和沉淀。有機溶劑引起蛋白質(zhì)沉淀的另一種解釋認(rèn)為與鹽析相似,有機溶劑與蛋白質(zhì)爭奪水分子,致使蛋白質(zhì)脫除水化膜,而易于聚集形成沉淀。
3、等電點法
原理:在等電點時,蛋白質(zhì)分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負電荷相等),此時蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒很容易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀,所以蛋白質(zhì)在等電點時,其溶解度小,容易形成沉淀物。等電點時的許多物理性質(zhì)如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小,從而有利于懸浮液的過濾。
植物蛋白提取試劑盒用于植物組織中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑,作用溫和,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗,由于含有酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶的研究。