RNAwait是一種無毒的可直接使用的樣品儲存液,能使細(xì)胞內(nèi)的RNA與RNA酶分離,可以快速可靠地保存動物組織、細(xì)胞內(nèi)的RNA。組織獲取后立即浸入RNAwait保存液中,在室溫可以保存7天,4℃可以保存4周,-20℃、-80℃標(biāo)本可以長期保存,RNA穩(wěn)定存在不降解,取出后用各類方法抽提可以獲得高質(zhì)量的RNA。
操作流程:
1. 根據(jù)要保存的各樣本的體積,計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait)。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中;
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。
4. 保存時先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過一夜(4℃過一夜是必需的,這樣可使RNAwait*滲入到組織中),然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃時仍為液態(tài),有結(jié)晶析出,是正常情況);或者在4℃冰箱過一夜后,從RNAwait中取出組織塊,轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標(biāo)本,反復(fù)凍融室溫20次不影響RNA的質(zhì)量。
注意事項:
1. 組織和細(xì)胞取材速度要快,在獲取后應(yīng)當(dāng)盡快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰凍組織不能用RNAwait保存,因為RNAwait不能有效滲入冰凍組織。
3. 保存樣品的RNA提?。簶颖緩?20℃或-80℃冰箱取出后,復(fù)蘇到室溫后,取出組織塊,再用于提取RNA。細(xì)胞樣本則復(fù)溫后低速離心收集細(xì)胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后繼的處理(如組織勻漿)可以在室溫下進(jìn)行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保護(hù)。殘留少量RNAwait保存液不影響后繼提取RNA的質(zhì)量。
北京索萊寶科技有限公司自產(chǎn)產(chǎn)品RNAwait(非凍型組織RNA保存液),貨號為SR0020,此產(chǎn)品操作簡單,方便運輸,兼容性廣。處理過的樣品可以提取RNA,而不影響RNA提取的質(zhì)量。也可直接用于組織切片、免疫學(xué)和流式細(xì)胞分析。